Повышение эффективности диагностики рака щитовидной железы в трудных диагностических условиях с помощью методов молекулярной диагностики

Цель исследования. Разработать диагностический калькулятор оценки экспрессии значимых для онкогенеза рака щитовидной железы (ЩЖ) профильных микроРНК (миРНК), внедрить его в клиническую практику и оценить эффективность предложенного способа ранней диагностики злокачественных новообразований ЩЖ в неопределенных после тонкоигольной аспирационной биопсии (ТАБ) диагностических ситуациях.

Материал и методы. Разработанный ранее «Способ диагностики злокачественных новообразований щитовидной железы» (патент RU 2820815 C 1) апробирован на 284 пациентах диспансерной группы с узловыми образованиями ЩЖ по результатам УЗИ и неопределенным заключением после ТАБ. Число пациентов с папиллярной карциномой ЩЖ составило 83 (29,2%), фолликулярной карциномой 43 (15,1%) и с доброкачественной патологией ЩЖ (фолликулярная аденома) – 158 (55,6%) человек. Методом ПЦР в режиме реального времени проводили оценку экспрессии миРНК-146b и –574–3р в цитологических образцах узловых образований ЩЖ после ТАБ.

Результаты. У больных раком ЩЖ экспрессия миРНК-146b по сравнению с пациентами с доброкачественной патологией была выше (р=0,007), а экспрессионная активность миРНК-574–3р ниже (р=0,013). Для оценки индекса реципрокной парной дисрегуляции экспрессии миРНК-146b и миРНК-574–3р в клетках ЩЖ рекомендовано определение соотношения величин экспрессии соответствующих молекул. Если индекс соотношения экспрессии миРНК-146b и миРНК-574–3р выше 4,5, то формируют заключение о злокачественном новообразовании ЩЖ. Диагностический коэффициент, рассчитываемый по разработанной формуле по методу логистической регрессии, также позволяет при сопоставлении с разделительным уровнем диагностировать злокачественное новообразование ЩЖ. Предложенные методы отличаются высокой информативностью.

Вывод. Оценка экспрессии миРНК-146b и миРНК-574–3р в клетках узловых образований ЩЖ, полученных при ТАБ, позволяет улучшить диагностику злокачественной патологии при мутационно-негативных узлах ЩЖ с неопределенными результатами ТАБ.

1. Grussendorf M., Ruschenburg I., Brabant G. Malignancy rates in thyroid nodules: A long-term cohort study of 17,592 patients. Eur. Thyroid. J. 2022; 11: e220027. DOI: 10.1530/ETJ-22–0027.

2. Miranda-Filho A., Lortet-Tieulent J., Bray F., Cao B., Franceschi S., Vaccarella S., Dal Maso L. Thyroid Cancer Incidence Trends by Histology in 25 Countries: A Population-Based Study. Lancet Diabetes Endocrinol. 2021; 9: 225–234. DOI: 10.1016/S2213–8587(21)00027–9.

3. Titov S., Demenkov P. S., Lukyanov S. A. Preoperative detection of malignancy in fine needle aspiration cytology (FNAC) smears with indeterminate cytology (Bethesda III, IV) by a combined molecular classifier. J Clin Pathol. 2020; 73(11): 722–727. DOI: 10.1136/jclinpath-2020–206445

4. Paschke R., Cantara S., Crescenzi A., Jarzab B., Musholt T.J., Sobrinho Simões M. European Thyroid Association Guidelines regarding Thyroid Nodule Molecular Fine-Needle Aspiration Cytology Diagnostics. Eur. Thyroid J. 2017; 6: 115–129. DOI: 10.1159/000468519.

5. Ali S.Z., Baloch Z.W., Cochand-Priollet B., Schmitt F.C., Vielh P., Vander Laan P.A. The 2023 Bethesda System for Reporting Thyroid Cytopathology. Thyroid. 2023; 33: 1039–1044. DOI: 10.1089/thy.2023.0141.

6. Hlozek J., Pekova B., Rotnágl J., Holy R., Astl J. Genetic Changes in Thyroid Cancers and the Importance of Their Preoperative Detection in Relation to the General Treatment and Determination of the Extent of Surgical Intervention – A Review. Biomedicines. 2022; 10: 1515. DOI: 10.3390/biomedicines10071515.

7. Семина Е.В., Рысенкова К.Д., Трояновский К.Э., Шмакова А.А., Рубина К.А. МикроРНК в онкологии: от механизмов регуляции экспрессии генов до перепрограммирования метастатической ниши. Биохимия. 2021; 86(5): 672–688. DOI:10.31857/S0320972521050055.

8. Knyazeva, M., Korobkina E., Karizky A., Sorokin M., Buzdin A., Vorobyev S., Malek A. Reciprocal dysregulation of MiR-146b and MiR-451 contributes in malignant phenotype of follicular thyroid tumor. Int J Mol Sci. 2020; 21(17): 5950. DOI: 10.3390/ijms21175950.

9. He H., Jazdzewski K., Li W., Liyanarachchi S., Nagy R., Volinia S. et al. The role of microRNA genes in papillary thyroid carcinoma. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2005; 102 (52): 19075–19080. DOI: 10.1073/pnas.0509603102.

10. Бандык Я.А., Князева М.С., Гаранин А.Ю., Кацуба К.Е., Забегина Л.М., Шаронова Т.В. с соавт. Возможности дифференциальной диагностики фолликулярных неоплазий щитовидной железы путем анализа малых некодирующих РНК // Вопросы онкологии. 2024; 70(2): 189–201. DOI: 10.37469/0507–3758–2024–70–2–189–201.

11. Титов С.Е., Лукьянов С.А., Сергийко С.В., Веряскина Ю.А., Ильина Т.Е., Козорезова Е.С., Воробьев С.Л. Проблемы диагностики фолликулярного рака щитовидной железы. Опухоли головы и шеи. 2023; 13(3): 10–23. DOI: 10.17650/2222–1468–2023–13–3–10–23.

12. Wei Z.L., Gao A.B., Wang Q., Lou X.E., Zhao J., Lu Q.J. MicroRNA-221 promotes papillary thyroid carcinoma cell migration and invasion via targeting RECK and regulating epithelial–mesenchymal transition. OncoTargets Ther. 2019; 12: 2323–2333. DOI: 10.2147/OTT.S190364.

13. Castagna M.G., Marzocchi C., Pilli T., Forleo R., Pacini F., Cantara S. MicroRNA expression profile of thyroid nodules in fine-needle aspiration cytology: A confirmatory series. J. Endocrinol. Investig. 2019;42:97–100. DOI: 10.1007/s40618–018–0880–6.

14. Малек А.В., Князева М.С., Киль Ю.В. Способ анализа микроРНК в образцах биологического материала. Патент на изобретение RU2783509 C1, 14.11.2022.

15. Makarova J.A., Shkurnikov M.U., Wicklein D., Lange T., Samatov T.R., Turchinovich A.A., Tonevitsky A.G. Intracellular and extracellular microRNA: An update on localization and biological role. Progress in Histochemistry and Cytochemistry. 2016; 51(3–4): 33–49. DOI: 10.1016/j.proghi.2016.06.001.

16. Silaghi C.A., Lozovanu V., Georgescu C.E., Georgescu R.D., Susman S., Năsui B.A. et al. Thyroseq v3, Afirma GSC, and microRNA Panels Versus Previous Molecular Tests in the Preoperative Diagnosis of Indeterminate Thyroid Nodules: A Systematic Review and Meta-Analysis. Front. Endocrinol. 2021; 12: 649522. DOI: 10.3389/fendo.2021.649522.

17. Santos M. T., Rodrigues B. M., Shizukuda S., Oliveira A. F., Oliveira M., Figueiredo D. L. et al. Clinical decision support analysis of a microRNA-based thyroid molecular classifier: A real-world, prospective and multicentre validation studies. EBioMedicine. 2022; 82: 104137. DOI: 10.1016/j.ebiom.2022.104137.

18. Rosignolo F., Memeo L., Monzani F. et al. MicroRNA-based molecular classification of papillary thyroid carcinoma. International Journal of Oncology. 2017; 50(5): 1767–1777. DOI: 10.3892/ijo.2017.3960.

19. Napoli F., Rapa I., Mortara U., Massa F., Izzo S., Rigutto A. et al. MicroRNA profiling predicts positive nodal status in papillary thyroid carcinoma in the preoperative setting. Cancer Cytopathol. 2022; 130: 695–704. DOI: 10.1002/cncy.22585.

20. Забегина Л.М., Титов С.Е., Иванов М.К., Назарова И.В., Малек А.В. МикроРНК из ТПО (+) экзосом – потенциальный маркер для дифференцировки злокачесвтвенных и доброкачественных форм фолликулярных опухолей щитовидной железы. Гены и клетки. 2020; 15(S3): 49–50. DOI: 10.23868/gc122630

21. Sheikholeslami S., Shabani N., Shivaee S., Tavangar S.M., Yeganeh M., Hedayati M. Overexpression of miR-129–1, miR-146b, miR-183, and miR-197 in follicular thyroid carcinoma and adenoma tissues. Mol. Cell Probes. 2020; 51: 1–6. DOI: 10.1016/j.mcp.2020.101536.