Значение определения генотипов Gardnerella vaginalis в диагностике рецидивирующего бактериального вагиноза
https://doi.org/10.33667/2078-5631-2021-30-48-52
Аннотация
Цель исследования. Оценить значение выявления разных генотипов Gardnerella vaginalis в диагностике рецидивирующего бактериального вагиноза.
Материалы и методы. В исследовании участвовали 299 женщин репродуктивного возраста. Все пациентки были разделены на три группы (здоровые женщины, женщины с первым эпизодом бактериального вагиноза и женщины с рецидивирующим бактериальным вагинозом). ДНК Gardnerella vaginalis в отделяемом влагалища выявляли методом ПЦР в реальном времени. Обнаружение четырех генотипов G. vaginalis выполнено с использованием мультиплексного ПЦР в реальном времени. Для количественного определения амплифицированных ПЦР-фрагментов были сконструированы стандартные количественные образцы. Статистический анализ результатов осуществляли с использованием статистического пакета NCSS11 (NCSS, LCC).
Результаты. У 38,2% здоровых женщин в вагинальном биотопе выявляли какой-либо генотип G. vaginalis, причем наиболее часто это был генотип 4 (35,2%), при этом концентрация ДНК G. vaginalis была низкой (102–103 ГЭ/мл). При выявлении нескольких генотипов гарднерелл одновременно у здоровых женщин концентрация ДНК не превышала 104 ГЭ/мл. Совершенно другая картина наблюдалась среди женщин с бактериальным вагинозом (БВ). При первом эпизоде БВ превалировал 4-й генотип G. vaginalis как в качестве единственного генотипа, так и в сочетании с 1-м, или 2-м, или 3-м. При рецидивирующем течении БВ выявлялись исключительно сразу 3–4 генотипа G. vaginalis, причем в 78% случаев имело место сочетание 1-го, 2-го и 4-го генотипов, а концентрация ДНК составляла 107–108 ГЭ/мл.
Заключение. Для диагностики рецидивирующих форм БВ необходимы разработка и внедрение в практику лабораторной диагностики тест-системы для выявления разных генотипов G. vaginalis методом ПЦР в реальном времени.
Об авторах
А. А. КрысановаРоссия
Крысанова Анна Александровна, н. с. группы экспериментальной микробиологии; ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ФП и ДПО
ID researcher: K‑3678–2018. Scopus: 57199643089
Санкт-Петербург
А. Е. Гущин
Россия
Гущин Александр Евгеньевич, к. б. н., вед. н. с.
Санкт-Петербург
А. М. Савичева
Россия
Савичева Алевтина Михайловна, д. м. н., проф., з. д. н. РФ, зав. отделом медицинской микробиологии; зав. кафедрой клинической лабораторной диагностики
ID researcher: P‑6788–2015. Scopus: 6602838765
Санкт-Петербург
Список литературы
1. Shipitsyna E, Khusnutdinova T, Budilovskaya O et al. Bacterial vaginosis-associated vaginal microbiota is an age-independent risk factor for Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium and Trichomonas vaginalis infections in low-risk women, St. Petersburg, Russia. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2020 Jul; 39 (7): 1221–1230. DOI: 10.1007/s10096–020–03831-w. Epub 2020 Feb 8. PMID: 32036466. PMCID: PMC7303053.
2. Schwebke JR, Desmond R. Natural history of asymptomatic bacterial vaginosis in a high-risk group of women. Sexually transmitted diseases. 2007; 34 (11): 876–7. DOI: 10.1097/OLQ.0b013e318073bd82.
3. Oduyebo OO, Anorlu RI, Ogunsola FT. The effects of antimicrobial therapy on bacterial vaginosis in non-pregnant women. Cochrane Database Syst Rev 2009; DOI: 10.1002/14651858.CD006055.pub2.
4. Sobel JD, Schmitt C, Meriwether C. Long-term follow-up of patients with bacterial vaginosis treated with oral metronidazole and topical clindamycin. J Infect Dis. 1993 Mar; 167 (3): 783–4. DOI: 10.1093/infdis/167.3.783. PMID: 8440952.
5. Bradshaw CS, Morton AN, Hocking J, et al. High recurrence rates of bacterial vaginosis over the course of 12 months after oral metronidazole therapy and factors associated with recurrence. J Infect Dis. 2006 Jun 1; 193 (11): 1478–86. DOI: 10.1086/503780. Epub 2006 Apr 26. PMID: 16652274.
6. Bradshaw CS, Walker SM, Vodstrcil LA, et.al. The influence of behaviors and relationships on the vaginal microbiota of women and their female partners: the WOW Health Study. J Infect Dis. 2014 May 15; 209 (10): 1562–72. DOI: 10.1093/infdis/jit664. Epub 2013 Nov 27. PMID: 24285846.
7. Vodstrcil LA, Walker SM, Hocking JS, et.al. Incident bacterial vaginosis (BV) in women who have sex with women is associated with behaviors that suggest sexual transmission of BV. Clin Infect Dis. 2015 Apr 1; 60 (7): 1042–53. DOI: 10.1093/cid/ciu1130. Epub 2014 Dec 16. PMID: 25516188.
8. Swidsinski A, Mendling W, Loening-Baucke V, et.al. An adherent Gardnerella vaginalis bioflm persists on the vaginal epithelium after standard therapy with oral metronidazole. Am J Obstet Gynecol. 2008 Jan; 198 (1): 97.e1–6. DOI: 10.1016/j.ajog.2007.06.039. Epub 2007 Nov 19. PMID: 18005928.
9. Swidsinski A, Loening-Baucke V, Mendling W, et.al. Infection through structured polymicrobial Gardnerella bioflms (StPM-GB). Histol Histopathol. 2014 May; 29 (5): 567–87. DOI: 10.14670/HH-29.10.567. Epub 2013 Dec 11. PMID: 24327088.
10. Muzny CA, Schwebke JR. Bioflms: An Underappreciated Mechanism of Treatment Failure and Recurrence in Vaginal Infections. Clin Infect Dis. 2015 Aug 15; 61 (4): 601–6. DOI: 10.1093/cid/civ353. Epub 2015 May 1. PMID: 25935553. PMCID: PMC4607736.
11. Machado A, Cerca N. Influence of Bioflm Formation by Gardnerella vaginalis and Other Anaerobes on Bacterial Vaginosis. J Infect Dis. 2015 Dec 15; 212 (12): 1856–61. DOI: 10.1093/infdis/jiv338. Epub 2015 Jun 16. PMID: 26080369.
12. Castro J, Cerca N. BV and non-BV associated Gardnerella vaginalis establish similar synergistic interactions with other BV-associated microorganisms in dual-species bioflms. Anaerobe. 2015 Dec; 36: 56–9. DOI: 10.1016/j.anaerobe.2015.10.008. Epub 2015 Oct 24. PMID: 26505928.
13. Swidsinski A, Loening-Baucke V, Swidsinski S, Verstraelen H. Polymicrobial Gardnerella bioflm resists repeated intravaginal antiseptic treatment in a subset of women with bacterial vaginosis: a preliminary report. Arch Gynecol Obstet. 2015 Mar; 291 (3): 605–9. DOI: 10.1007/s00404–014–3484–1. Epub 2014 Sep 23. PMID: 25245669.
14. Alves P, Castro J, Sousa C, Cereija TB, Cerca N. Gardnerella vaginalis outcompetes 29 other bacterial species isolated from patients with bacterial vaginosis, using in an in vitro bioflm formation model. J Infect Dis. 2014 Aug 15; 210 (4): 593–6. DOI: 10.1093/infdis/jiu131. Epub 2014 Mar 4. PMID: 24596283.
15. Machado A, Jefferson KK, Cerca N. Interactions between Lactobacillus crispatus and bacterial vaginosis (BV)-associated bacterial species in initial attachment and bioflm formation. Int J Mol Sci. 2013 Jun 5; 14 (6): 12004–12. DOI: 10.3390/ijms140612004. PMID: 23739678. PMCID: PMC3709769.
16. Castro J, Alves P, Sousa C, Cereija T, França Â, Jefferson KK, Cerca N. Using an in-vitro bioflm model to assess the virulence potential of bacterial vaginosis or non-bacterial vaginosis Gardnerella vaginalis isolates. Sci Rep. 2015 Jun 26; 5: 11640. DOI: 10.1038/srep11640. PMID: 26113465. PMCID: PMC4481526.
17. Piot P, Van Dyck E, Peeters M, Hale J, Totten PA, Holmes KK. Biotypes of Gardnerella vaginalis. J Clin Microbiol. 1984 Oct; 20 (4): 677–9. DOI: 10.1128/JCM.20.4.677–679.1984. PMID: 6333436. PMCID: PMC271409.
18. Benito R, Vazquez JA, Berron S, Fenoll A, Saez-Neito JA. A modifed scheme for biotyping Gardnerella vaginalis. J Med Microbiol. 1986 Jun; 21 (4): 357–9. DOI: 10.1099/00222615–21–4–357. PMID: 3088281.
19. Santiago GL, Deschaght P, El Aila N, Kiama TN, Verstraelen H, Jefferson KK, Temmerman M, Vaneechoutte M. Gardnerella vaginalis comprises three distinct genotypes of which only two produce sialidase. Am J Obstet Gynecol. 2011 May; 204 (5): 450. e1–7. DOI: 10.1016/j.ajog.2010.12.061. Epub 2011 Mar 27. PMID: 21444061.
20. Paramel Jayaprakash T, Schellenberg JJ, Hill JE. Resolution and characterization of distinct cpn60-based subgroups of Gardnerella vaginalis in the vaginal microbiota. PLoS One. 2012; 7 (8): e43009. DOI: 10.1371/journal.pone.0043009. Epub 2012 Aug 10. PMID: 22900080. PMCID: PMC3416817.
21. Ahmed A, Earl J, Retchless A, Hillier SL, Rabe LK, Cherpes TL, Powell E, Janto B, Eutsey R, Hiller NL, Boissy R, Dahlgren ME, Hall BG, Costerton JW, Post JC, Hu FZ, Ehrlich GD. Comparative genomic analyses of 17 clinical isolates of Gardnerella vaginalis provide evidence of multiple genetically isolated clades consistent with subspeciation into genovars. J Bacteriol. 2012 Aug; 194 (15): 3922–37. DOI: 10.1128/JB.00056–12. Epub 2012 May 18. PMID: 22609915. PMCID: PMC3416530.
22. Lewis WG, Robinson LS, Gilbert NM, Perry JC, Lewis AL. Degradation, foraging, and depletion of mucus sialoglycans by the vagina-adapted Actinobacterium Gardnerella vaginalis. J Biol Chem. 2013 Apr 26; 288 (17): 12067–79. DOI: 10.1074/jbc.M113.453654. Epub 2013 Mar 11. PMID: 23479734. PMCID: PMC3636892.
23. Briselden AM, Moncla BJ, Stevens CE, Hillier SL. Sialidases (neuraminidases) in bacterial vaginosis and bacterial vaginosis-associated microflora. J Clin Microbiol. 1992 Mar; 30 (3): 663–6. DOI: 10.1128/JCM.30.3.663–666.1992. PMID: 1551983. PMCID: PMC265128.
24. Swidsinski A, Doerffel Y, Loening-Baucke V, Swidsinski S, Verstraelen H, Vaneechoutte M, Lemm V, Schilling J, Mendling W. Gardnerella biofilm involves females and males and is transmitted sexually. Gynecol Obstet Invest. 2010; 70 (4): 256–63. DOI: 10.1159/000314015. Epub 2010 Oct 16. PMID: 21051845.
25. Vaneechoutte M, Guschin A, Van Simaey L, Gansemans Y, Van Nieuwerburgh F, Cools P. Emended description of Gardnerella vaginalis and description of Gardnerella leopoldii sp. nov., Gardnerella piotii sp. nov. and Gardnerella swidsinskii sp. nov., with delineation of 13 genomic species within the genus Gardnerella. Int J Syst Evol Microbiol. 2019 Mar; 69 (3): 679–687. DOI: 10.1099/ijsem.0.003200. Epub 2019 Jan 16. PMID: 30648938.
26. Brooke M Faught 1, Sonia Reyes J Womens Health (Larchmt) 2019 Sep; 28 (9): 1218–1226. Characterization and Treatment of Recurrent Bacterial Vaginosis DOI: 10.1089/jwh.2018.7383.
27. Balashov SV, Mordechai E, Adelson ME, Gygax SE. Identifcation, quantifcation and subtyping of Gardnerella vaginalis in noncultured clinical vaginal samples by quantitative PCR. J Med Microbiol. 2014 Feb; 63 (Pt 2): 162–175. DOI: 10.1099/jmm.0.066407–0. Epub 2013 Nov 7. PMID: 24200640.
28. Zozaya-Hinchliffe M, Lillis R, Martin DH, Ferris MJ. Quantitative PCR assessments of bacterial species in women with and without bacterial vaginosis. J Clin Microbiol. 2010 May; 48 (5): 1812–9. DOI: 10.1128/JCM.00851–09.
29. Castro J, Jefferson KK, Cerca N. Genetic Heterogeneity and Taxonomic Diversity among Gardnerella Species. Trends Microbiol. 2020 Mar; 28 (3): 202–211. DOI: 10.1016/j.tim.2019.10.002. Epub 2019 Nov 4. PMID: 31699644.
30. Castro J, Machado D, Cerca N. Unveiling the role of Gardnerella vaginalis in polymicrobial Bacterial Vaginosis bioflms: the impact of other vaginal pathogens living as neighbors. ISME J. 2019 May; 13 (5): 1306–1317. DOI: 10.1038/s41396–018–0337–0. Epub 2019 Jan 22. PMID: 30670827. PMCID: PMC6474217.
31. Machado A, Cerca N. Multiplex Peptide Nucleic Acid Fluorescence in Situ Hybridization (PNA-FISH) for Diagnosis of Bacterial Vaginosis. Methods Mol Biol. 2017; 1616: 209–219. DOI: 10.1007/978–1–4939–7037–7_13. PMID: 28600771.
Рецензия
Для цитирования:
Крысанова А.А., Гущин А.Е., Савичева А.М. Значение определения генотипов Gardnerella vaginalis в диагностике рецидивирующего бактериального вагиноза. Медицинский алфавит. 2021;1(30):48-52. https://doi.org/10.33667/2078-5631-2021-30-48-52
For citation:
Krysanova A.A., Gushchin A.E., Savicheva A.M. Significance of Gardnerella vaginalis genotyping in diagnosis of recurrent bacterial vaginosis. Medical alphabet. 2021;1(30):48-52. (In Russ.) https://doi.org/10.33667/2078-5631-2021-30-48-52