medalphabetМедицинский алфавитMedical alphabet2078-56312949-2807ООО «Альфмед»10.33667/2078-5631-2020-5-30-33medalphabet-1463Research ArticleСтатьиИнтенсивность роста ламеллы как характеристика морфофункционального статуса тромбоцитов человекаIntensity of lamella growth as morphofunctional feature of human plateletsМакаровМ. С.MakarovM. S.

к. б. н., с. н. с.

Moscow

ГБУЗ г. Москвы «Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н. В. Склифосовского» Департамента здравоохранения г. МосквыРоссияResearch Institute of Emergency Care n. a. N. V. SklifosovskyRussian Federation20201506202005Современная лаборатория3033Copyright © Макаров М.С., 20202020Макаров М.С.Makarov M.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.med-alphabet.com/jour/article/view/1463Цель работы

Цель работы. Исследовать морфофункциональные особенности образования ламеллы в тромбоцитах здоровых людей и пациентов с тромботическими осложнениями.

Материалы и методы

Материалы и методы. В работе исследовали тромбоциты доноров крови, пациентов с тромбозами вен нижних конечностей, пациентов с тромботическими осложнениями на фоне глубокой термической травмы. Морфофункциональный анализ проводили с помощью оригинального метода, основанного на витальном окрашивании клеток.

Результаты

Результаты. В крови пациентов с тромбозами вен морфофункциональный статус тромбоцитов был повышен, у ожоговых пациентов – резко снижен. Через 10–15 минут адгезии на стекле среди тромбоцитов выявлялись три субпопуляции: тромбоциты без ламеллы, склонные к быстрой дегрануляции (первый тип); тромбоциты с ламеллоподиями (второй тип); тромбоциты с широкой ламеллой, охватывающей весь периметр клетки (третий тип). В крови доноров большинство адгезирующих тромбоцитов первого и второго типов формировали обширную ламеллу через 1–2 часа адгезии, у пациентов с тромбозами вен – через 30–35 минут. При тромбозах вен интенсивный рост ламеллы в адгезирующих тромбоцитах сопровождался быстрой дегрануляцией клеток без ламеллы и образованием агрегатов на стекле. У пациентов с глубокими ожогами тромбоциты очень медленно адгезировали, рост ламеллоподий отмечен менее чем у 20 % адгезирующих тромбоцитов. Среди доноров крови выявлена неоднородность по уровню тромбоцитов, способных к быстрому выбросу гранул при контакте с адгезивным субстратом.

Выводы

Выводы. Отсутствие роста тромбоцитарной ламеллы может наблюдаться как при низком, так и высоком морфофункциональном статусе тромбоцитов. При тромбозах вен скорость роста ламеллы заметно увеличивается. Среди адгезивно активных тромбоцитов с гранулами существует субпопуляция клеток, способных к быстрому выбросу гранул как при патологии, так и в норме.

Aim

Aim. To study morphofunctional properties of platelet lamella′s forming in donors and patients with thrombotic disorders.

Materials and methods

Materials and methods. We studied platelets of blood donors, patients with deep venous thrombosis, burned patients with thrombotic disorders. Morphofunctional analysis was performed, using original method, based on cell vital staining.

Results

Results. In patients with deep venous thrombosis morphofunctional platelet value was enhanced, in burned patients with thrombotic disorders platelet integrity was low. After 10–15 minutes of adhesion on glass spreading platelets maintained 3 subpopulations: cells without lamella, able to fluent granule efflux (1th type); cell with lamellipodias (2th type); cells with wide lamella, covering cell perimeter (3th type). In donors′ blood most of spreading platelets formed lamella at 1–2 hours, in patients with deep venous thrombosis this process was noticeably accelerated, estimating 30–35 minutes, what is more, spreading platelets viewed both intensive lamella′s growth and rapid degranulation of cells without lamella, followed by aggregation on the glass. Burned patients had significant decay of platelet adhesion, lamella formation was low-identified – less than 20 % of spread platelets formed lamellipodias. Among blood donors one could notice heterogeneous level of platelets, capable to rapid granules′ release during contact with adhesive substrate.

Conclusion

Conclusion. The lack of lamella forming may occur both at low and high morphofunctional platelet rate. During deep venous thrombosis lamella′s growth velocity was noticeably increased. Among spreading platelets with granules one could find subpopulation of cells, capable to rapid granules′ release in norm and pathology.

тромбоцитыгранулыадгезияламелладегрануляцияplateletsgranulesadhesionlamelladegranulationReferencesВасильев С. А., Виноградов В. Л., Карабудагова З. К. Структура и функции тромбоцитов // Гематология и трансфузиология. – 2010. – Том 55, № 5. – С. 4–9.Васильев С. А., Виноградов В. Л., Карабудагова З. К. Структура и функции тромбоцитов // Гематология и трансфузиология. – 2010. – Том 55, № 5. – С. 4–9.Мазуров А. В. Физиология и патология тромбоцитов. – М.: Литерра, 2011. – 248 с.Мазуров А. В. Физиология и патология тромбоцитов. – М.: Литерра, 2011. – 248 с.Шиффман Ф. Дж. Патофизиология крови. Пер. с англ. Н. Б. Серебряная, В. И. Соловьев. – М.: Бином, 2016. – 448 с.Шиффман Ф. Дж. Патофизиология крови. Пер. с англ. Н. Б. Серебряная, В. И. Соловьев. – М.: Бином, 2016. – 448 с.Feng Y., Yu M., Zhu F., Zhang S., Ding P., Wang M. IL-9 Promotes the development of deep venous thrombosis by facilitating platelet function // Thromb Haemost. – 2018. – Vol. 118, № 11. – Р. 1885–1894.Feng Y., Yu M., Zhu F., Zhang S., Ding P., Wang M. IL-9 Promotes the development of deep venous thrombosis by facilitating platelet function // Thromb Haemost. – 2018. – Vol. 118, № 11. – Р. 1885–1894.Icli A., Aksoy F., Turker Y., Uysal B. A., Alpay M. F., Dogan A., Nar G., Varol E. Relationship between mean platelet volume and pulmonary embolism in patients with deep vein thrombosis // Heart Lung Circ. – 2015. – Vol. 24, № 11. – Р. 1081–1086.Icli A., Aksoy F., Turker Y., Uysal B. A., Alpay M. F., Dogan A., Nar G., Varol E. Relationship between mean platelet volume and pulmonary embolism in patients with deep vein thrombosis // Heart Lung Circ. – 2015. – Vol. 24, № 11. – Р. 1081–1086.Борисов В. С. Венозные тромбоэмболические осложнения при термической травме // Неотложная медицинская помощь. Журнал им. Н. В. Склифосовского. – 2016. – № 4. – С. 37–41.Борисов В. С. Венозные тромбоэмболические осложнения при термической травме // Неотложная медицинская помощь. Журнал им. Н. В. Склифосовского. – 2016. – № 4. – С. 37–41.Podoplelova N. A., Sveshnikova A. N., Kotova Y. N., Eckly A., Receveur N., Nechipurenko D. Y., Obydennyi S. I., Kireev I. I., Gachet C., Ataullakhanov F. I., Mangin P. H., Panteleev M. A. Coagulation factors bound to procoagulant platelets concentrate in cap structures to promote clotting // Blood. – 2016. – Vol. 128, № 13. – P. 1745–1755.Podoplelova N. A., Sveshnikova A. N., Kotova Y. N., Eckly A., Receveur N., Nechipurenko D. Y., Obydennyi S. I., Kireev I. I., Gachet C., Ataullakhanov F. I., Mangin P. H., Panteleev M. A. Coagulation factors bound to procoagulant platelets concentrate in cap structures to promote clotting // Blood. – 2016. – Vol. 128, № 13. – P. 1745–1755.Bye A. P., Unsworth A. J., Gibbins J. M. Screening and High-Throughput Platelet Assays // Methods Mol Biol. – 2018. – Vol. 1812. – P. 81–94.Bye A. P., Unsworth A. J., Gibbins J. M. Screening and High-Throughput Platelet Assays // Methods Mol Biol. – 2018. – Vol. 1812. – P. 81–94.Колосова Е. И., Василенко И. А., Ковалева Л. Г. Оценка морфофункционального состояния тромбоцитов у больных идиопатической тромбоцитопенической пурпурой методом компьютерной морфометрии // Бюллетень СО РАМН. – 2011. – Том 31, № 2. – С. 58–63.Колосова Е. И., Василенко И. А., Ковалева Л. Г. Оценка морфофункционального состояния тромбоцитов у больных идиопатической тромбоцитопенической пурпурой методом компьютерной морфометрии // Бюллетень СО РАМН. – 2011. – Том 31, № 2. – С. 58–63.Макаров М. С., Хватов В. Б., Кобзева Е. Н., Боровкова Н. В., Высочин И. В. Морфофункциональный анализ тромбоцитов человека с помощью витального окрашивания // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2013. – № 9. – С. 388–391.Макаров М. С., Хватов В. Б., Кобзева Е. Н., Боровкова Н. В., Высочин И. В. Морфофункциональный анализ тромбоцитов человека с помощью витального окрашивания // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2013. – № 9. – С. 388–391.Макаров М. С. Особенности морфофункционального статуса тромбоцитов человека в норме и патологии. Дис. … канд. биол. наук: 14.01.21 – Гематология и переливание крови / НИИ СП им. Н. В. Склифосовского. – М. 2014. – 124 с.Макаров М. С. Особенности морфофункционального статуса тромбоцитов человека в норме и патологии. Дис. … канд. биол. наук: 14.01.21 – Гематология и переливание крови / НИИ СП им. Н. В. Склифосовского. – М. 2014. – 124 с.Kuchay S. M., Wieschhaus A. J., Marinkovic M., Herman I. M., Chishti A. H. Targeted gene inactivation reveals a functional role of calpain-1 in platelet spreading // J Thromb Haemost. – 2012. – Vol. 10, № 6. – P. 1120–1132.Kuchay S. M., Wieschhaus A. J., Marinkovic M., Herman I. M., Chishti A. H. Targeted gene inactivation reveals a functional role of calpain-1 in platelet spreading // J Thromb Haemost. – 2012. – Vol. 10, № 6. – P. 1120–1132.Welsh JD, Poventud-Fuentes I, Sampietro S, Diamond SL, Stalker TJ, Brass LF. Hierarchical organization of the hemostatic response to penetrating injuries in the mouse macrovasculature // J Thromb Haemost. – 2017. – Vol. 15. – P. 526–537.Welsh JD, Poventud-Fuentes I, Sampietro S, Diamond SL, Stalker TJ, Brass LF. Hierarchical organization of the hemostatic response to penetrating injuries in the mouse macrovasculature // J Thromb Haemost. – 2017. – Vol. 15. – P. 526–537.Gurbel PA, Tantry US. Do platelet function testing and genotyping improve outcomes in patients treated with antithrombotic agents? // Circulation. – 2012. – Vol. 125. – P. 1276–1287.Gurbel PA, Tantry US. Do platelet function testing and genotyping improve outcomes in patients treated with antithrombotic agents? // Circulation. – 2012. – Vol. 125. – P. 1276–1287.Vagdatli E., Gounari E., Lazaridou E., Katsibourlia E, Tsikopoulou F, Labrianou I. Platelet distribution width: a simple, practical and specific marker of activation of coagulation // Hippokratia. – 2010. – Vol. 14, № 1. – P. 28–32.Vagdatli E., Gounari E., Lazaridou E., Katsibourlia E, Tsikopoulou F, Labrianou I. Platelet distribution width: a simple, practical and specific marker of activation of coagulation // Hippokratia. – 2010. – Vol. 14, № 1. – P. 28–32.Зайцева Г. А., Ковтунова М. Е., Исаева Н. В., Матрохина О. И., Ивашкина Е. П. Показатели гомеостаза у различных категорий доноров // Вестник службы крови России. – 2013. – № 4. – С. 20–22.Зайцева Г. А., Ковтунова М. Е., Исаева Н. В., Матрохина О. И., Ивашкина Е. П. Показатели гомеостаза у различных категорий доноров // Вестник службы крови России. – 2013. – № 4. – С. 20–22.Момот А. П., Баркаган З. С. Исследование системы гемостаза у лиц пожилого возраста: основные цели и методы // Клиническая геронтология. – 2007. – Том 13, № 4. – С. 44–49.Момот А. П., Баркаган З. С. Исследование системы гемостаза у лиц пожилого возраста: основные цели и методы // Клиническая геронтология. – 2007. – Том 13, № 4. – С. 44–49.Варламова С. В., Калинин Н. Н., Егорова М. О., Грибкова И. В., Шурхина Е. С., Шмаров Д. А., Ватагина Е. А., Мигунов В. Н., Городецкий В. М. Дополнительные критерии оценки состояния здоровья доноров аппаратного тромбоцитафереза // Гематология и трансфузиология. – 2014. – Том 59, № 1. – С. 19–25.Варламова С. В., Калинин Н. Н., Егорова М. О., Грибкова И. В., Шурхина Е. С., Шмаров Д. А., Ватагина Е. А., Мигунов В. Н., Городецкий В. М. Дополнительные критерии оценки состояния здоровья доноров аппаратного тромбоцитафереза // Гематология и трансфузиология. – 2014. – Том 59, № 1. – С. 19–25.Lindkvist M, Fernberg U, Ljungberg LU, Fälker K, Fernström M, Hurtig-Wennlöf A, Grenegård M. Individual variations in platelet reactivity towards ADP, epinephrine, collagen and nitric oxide, and the association to arterial function in young, healthy adults // Thromb Res. 2019. – Vol. 174. – P. 5–12.Lindkvist M, Fernberg U, Ljungberg LU, Fälker K, Fernström M, Hurtig-Wennlöf A, Grenegård M. Individual variations in platelet reactivity towards ADP, epinephrine, collagen and nitric oxide, and the association to arterial function in young, healthy adults // Thromb Res. 2019. – Vol. 174. – P. 5–12.Хаспекова С. Г., Сироткина О. В., Шиманова Ю. В., Мазуров А. В. Вариации содержания гликопротеина IIb-IIIa (α2β3 интегрина) у здоровых доноров. Влияние на агрегационную активность тромбоцитов и эффективность действия аспирина // Биомедицинская химия. –2008. – Том 54, № 3. – С. 361–371.Хаспекова С. Г., Сироткина О. В., Шиманова Ю. В., Мазуров А. В. Вариации содержания гликопротеина IIb-IIIa (α2β3 интегрина) у здоровых доноров. Влияние на агрегационную активность тромбоцитов и эффективность действия аспирина // Биомедицинская химия. –2008. – Том 54, № 3. – С. 361–371.Зотова Т. Ю., Мяндина Г. И., Фролов В. А., Комарова А. Г., Зотов А. К. Влияние полиморфизма гена ITGB на частоту развития артериальной гипертензии у больных с острым коронарным синдромом // Клиническая медицина. – 2013. – Том 91. № 8. – С. 22–24.Зотова Т. Ю., Мяндина Г. И., Фролов В. А., Комарова А. Г., Зотов А. К. Влияние полиморфизма гена ITGB на частоту развития артериальной гипертензии у больных с острым коронарным синдромом // Клиническая медицина. – 2013. – Том 91. № 8. – С. 22–24.Макаров М. С. Неканонические способы активации тромбоцитов человека // Медицинский алфавит. Современная лаборатория. – 2015. – Том 3, № 11. – С. 30–35.Макаров М. С. Неканонические способы активации тромбоцитов человека // Медицинский алфавит. Современная лаборатория. – 2015. – Том 3, № 11. – С. 30–35.Рахматуллина Д. М. Методы определения спонтанной агрегации тромбоцитов // Вестник современной медицины. – 2017. – Том 10, № 3. – С. 60–65.Рахматуллина Д. М. Методы определения спонтанной агрегации тромбоцитов // Вестник современной медицины. – 2017. – Том 10, № 3. – С. 60–65.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.