medalphabetМедицинский алфавитMedical alphabet2078-56312949-2807ООО «Альфмед»10.33667/2078-5631-2019-3-22(397)-62-67medalphabet-1212Research ArticleСтатьиФункциональная способность нейтрофилов у больных ишемической болезнью сердцаFunctional ability of neutrophils in patients with ischemic heart diseaseМишлановВ. Ю.MishlanovV. Yu.

д. м. н., проф., член-корр. РАН, зав. кафедрой пропедевтики внутренних болезней № 1

г. Пермь

Perm

ВладимирскийВ. В.VladimirskyV. E.

д. м. н., доцент, зав. кафедрой факультетской терапии № 1 с курсом физиотерапии ФДПО

г. Пермь

Perm

ТуевА. В.TuevA. V.

д. м. н., проф., заслуженный деятель науки России, проф. кафедры госпитальной терапии № 1

г. Пермь

Perm

ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет имени академика Е. А. Вагнера» Минздрава РоссииРоссияPerm State Medical University n. a. E. A. WagnerRussian Federation201922112019322Современная лаборатория6267Copyright © Мишланов В.Ю., Владимирский В.В., Туев А.В., 20192019Мишланов В.Ю., Владимирский В.В., Туев А.В.Mishlanov V.Y., Vladimirsky V.E., Tuev A.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.med-alphabet.com/jour/article/view/1212Цель

Цель. Изучение белокпродуцирующей и липидвысвобождающей способности нейтрофилов и ее клинической значимости у больных ИБС.

Материалы и методы

Материалы и методы. Обследованы 25 пациентов с артериальной гипертензией без клинических и ультразвуковых манифестаций атеросклероза; 47 больных ИБС со стабильной стенокардией напряжения, а также 19 больных первичной нестабильной стенокардией. Группа сравнения — 33 практически здоровых лица. В сыворотке крови посредством иммуноферментного анализа оценивалась концентрация С-реактивного белка (СРБ), липопротеина а (ЛПа), VII фактора свертывания крови (VIIф), дефензинов-альфа (1–3), интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина-8 (ИЛ-8), фактора некроза опухоли альфа (ФНО-альфа). Из периферической крови в присутствии декстранов выделялись лейкоциты, представленные преимущественно нейтрофилами, которые в дальнейшем культивировались, в лейкоцитарных супернатантах оценивалось содержание СРБ, ЛПа, дефензинов-альфа (1–3), VIIф, а также липидвысвобождающей способности лейкоцитов (ЛВСЛ) по методике А. В. Туева и В. Ю. Мишланова. Проводились ангиографическое исследование, дуплексное сканировавние артерий и эхокардиография.

Результаты

Результаты. Установлено, что у больных на этапе доклинического атеросклеротического поражения способность лейкоцитов к образованию белково-липидных комплексов (БЛК), маркируемая величиной ЛВСЛ, практически не отличается от здоровых лиц, но уже на этой стадии атерогенеза выявлено увеличение их способности к продукции противомикробных пептидов —  дефензинов-альфа (1–3). У больных ИБС со стабильной стенокардией напряжения отмечено увеличение продукции лейкоцитами широкого спектра белков — дефензинов-альфа (1–3), VIIф, ЛПа и СРБ в сочетании с признаками системной воспалительной реакции, маркируемой высокими концентрациями СРБ, интерлейкина-6 и фактора некроза опухоли альфа в сыворотке крови. На данном этапе атерогенеза величина ЛВСЛ значимо отличается от значений, характерных для здоровых лиц. Показано, что чем больше значение ЛВСЛ, тем выше у этих больных функциональный класс хронической сердечной недостаточности (R = 0,4; p = 0,02). У больных ИБС с первичной нестабильной стенокардией выявлена максимальная величина ЛВСЛ, а у пациентов с ультразвуковыми признаками нестабильности бляшек —  высокие концентрации СРБ в нейтрофильных супернатантах. Корреляционный анализ выявил, что у больных ИБС средний процент стеноза коронарных артерий, по данным ангиографии, напрямую взаимосвязан с величиной ЛВСЛ (R = 0,7; p = 0,03) и сывороточной концентрацией ФНО-альфа (R = 0,5; p = 0,03), а количество клинически значимых стенозов — с величиной ЛВСЛ (R = 0,4; p = 0,04) и концентрацией в супернатантах VIIф (R = 0,5; p = 0,04).

Заключение

Заключение. Величина ЛВСЛ, содержание СРБ и дефензинов-альфа в лейкоцитарных супернатантах у больных ИБС взаимосвязаны с тяжестью и активностью атеросклеротического поражения артерий, что подтверждается результатами обследования больных на этапе доклинического, клинически манифестного стабильного и нестабильного атеросклеротического поражения.

Purpose

Purpose. The study of protein-producing and lipid-releasing ability of neutrophils and its clinical significance in patients with IHD.

Materials and methods

Materials and methods. 25 patients with arterial hypertension without clinical and ultrasound manifestations of atherosclerosis were examined; 47 patients with coronary artery disease with stable angina, as well as 19 patients with unstable primary angina. The comparison group — 33 healthy persons. In the serum, enzyme-linked immunosorbent assay was used to evaluate the concentration of C-reactive protein (CRP), lipoprotein a (LPa), VII coagulation factor VII (VIIf), defensins-alpha (1–3), interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8), tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha). Leukocytes, predominantly represented by neutrophils, which were further cultivated, were excreted from peripheral blood in the presence of dextrans; the levels of CRP, LPa, defensins-alpha (1–3), VIIf, and lipid-releasing ability of leukocytes (LRAL) were assessed according to the method of A. V. Tuev and V. Yu. Mishlanov. An angiographic study, duplex scanning arteries, and echocardiography were performed.

Results

Results. It has been established that in patients at the stage of preclinical atherosclerotic lesion, the ability of leukocytes to form protein-lipid complexes (PLC), marked by LRAL, practically does not differ from healthy individuals, but already at this stage of atherogenesis an increase in their ability to produce antimicrobial peptides — defensins-alpha (1–3). In patients with coronary artery disease with stable angina pectoris, an increase in leukocyte production of a wide range of proteins — defensins-alpha (1–3), VIIf, LPA and CRP in combination with signs of a systemic inflammatory reaction, marked by high concentrations of CRP, interleukin-6 and tumor necrosis factor alpha in serum, was noticed. At this stage of atherogenesis, the value of LRAL is significantly different from the values of healthy individuals. It is shown that the higher the LRAL value, the higher the functional class of chronic heart failure in these patients (R = 0.4; p = 0.02). In patients with coronary artery disease with primary unstable angina, the maximum LRAL value was detected, and in patients with ultrasound signs of plaque instability, high concentrations of CRP in neutrophilic supernatants were found. Correlation analysis revealed that, in patients with coronary artery disease, the average percentage of coronary artery stenosis, according to angiography, is directly related to the LRAL value (R = 0.7; p = 0.03) and the serum concentration of TNF-alpha (R = 0.5; p = 0.03), and the number of clinically significant stenoses — with the magnitude of LRAL (R = 0.4; p = 0.04) and the concentration in supernatants VIIf (R = 0.5; p = 0.04).

Conclusion

Conclusion. The LRAL value, CRP and defensin-alpha content in leukocyte supernatants in IHD patients are interconnected with the severity and activity of atherosclerotic lesion of arteries, which is confirmed by the results of examination of patients at the stage of preclinical, clinically manifest stable and unstable atherosclerotic lesion.

атеросклерознейтрофилыврожденный иммунитетвоспалениеишемическая болезнь сердцаatherosclerosisneutrophilsinnate immunityinflammationcoronary heart diseaseReferencesBaetta R., Corsini A. Role of polymorphonuclear neutrophils in atherosclerosis: Current state and future perspectives. Atherosclerosis 2010; 210 (1): 1–13. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2009.10.028.Baetta R., Corsini A. Role of polymorphonuclear neutrophils in atherosclerosis: Current state and future perspectives. Atherosclerosis 2010; 210 (1): 1–13. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2009.10.028.van Leeuwen M., Gijbels M. J., Duijvestijn A., et al. Accumulation of myeloperoxidase-positive neutrophils in atherosclerotic lesions in LDLR-/mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2008; 28: 84–89. DOI: 10.1161/ATVBAHA.107.154807.van Leeuwen M., Gijbels M. J., Duijvestijn A., et al. Accumulation of myeloperoxidase-positive neutrophils in atherosclerotic lesions in LDLR-/mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2008; 28: 84–89. DOI: 10.1161/ATVBAHA.107.154807.Zernecke A., Bot I., Djalali-Talab Y., et al. Protective role of CXC receptor 4/ CXC ligand 12 unveils the importance of neutrophils in atherosclerosis. Circ Res 2008; 102: 209–217. DOI: 10.1161/CIRCRESAHA.107.160697.Zernecke A., Bot I., Djalali-Talab Y., et al. Protective role of CXC receptor 4/ CXC ligand 12 unveils the importance of neutrophils in atherosclerosis. Circ Res 2008; 102: 209–217. DOI: 10.1161/CIRCRESAHA.107.160697.Weber C., Zernecke A., Libby P. The multifaceted contributions of leukocyte subsets to atherosclerosis: lessons from mouse models. Nat Rev Immunol 2008; 8: 802–815. DOI: 10.1038/nri2415.Weber C., Zernecke A., Libby P. The multifaceted contributions of leukocyte subsets to atherosclerosis: lessons from mouse models. Nat Rev Immunol 2008; 8: 802–815. DOI: 10.1038/nri2415.Higazi A., Nassar T., Ganz T., Rader d., et al. The alpha-defensins stimulate proteoglycan-dependent catabolism of low-density lipoprotein by vascular cells: a new class of inflammatory apolipoprotein and a possible contributor to atherogenesis. Blood 2000; 96 (4): 1393–8. PMID: 10942383.Higazi A., Nassar T., Ganz T., Rader d., et al. The alpha-defensins stimulate proteoglycan-dependent catabolism of low-density lipoprotein by vascular cells: a new class of inflammatory apolipoprotein and a possible contributor to atherogenesis. Blood 2000; 96 (4): 1393–8. PMID: 10942383.Мишланов В. Ю., Туев А. В., Шутов А. А. и др. Метод липидвысвобождающей способности лейкоцитов в диагностике механизмов атерогенеза у больных ишемической болезнью сердца и мозговым ишемическим инсультом. Клиническая лабораторная диагностика 2006; 5: 9–12.Mishlanov V. Yu., Tuev А. V., Shutov А. А. i dr. Method lipid-releasing leukocytes ability in the diagnosis of mechanisms atherogenesis in patients with coronary heart disease and cerebral ischemic stroke. Klin. lab. Diagnostika 2006; 5: 9–12. RussianМишланов В. Ю., Сандаков П. Я., Владимирский В. Е. и др. Протеинсинтезирующая функция нейтрофилов и липидвысвобождающая способность лейкоцитов у больных атеросклерозом / Клиническая медицина 2013; 91 (12): 17–21.Mishlanov V. Yu., Sandakov P. Ya., Vladimirskij V. E. i dr. Proteinsynthetic function of neutrophils and lipid-releasing leukocytes ability in patients with atherosclerosis. Clinical Medicine 2013; 91 (12): 17–21. RussianБурцева Т. В., Мишланов В. Ю., Туев А. В. и др. Показатели сывороточных биомаркеров и липидвысвобождающей способности лейкоцитов при артериальной гипертензии и ишемической болезни сердца с разной степенью тяжести сердечной недостаточности. Врач-аспирант 2011; 3 (3): 482–489.Burtseva T. V., Mishlanov V. Yu., Tuev А. V. i dr. Levels of serum biomarkers and lipid-releasing leukocytes ability in arterial hypertension and ischemic heart disease with different severity of heart failure. Vrach-aspirant 2011; 3 (3): 482–489. RussianВладимирский В. Е. Белокпродуцирующая функция нейтрофилов у больных коронарным атеросклерозом. Современные проблемы науки и образования 2015; № 1: URL: www.science-education.ru/121–17420Vladimirskij V. E. Protein-producing function of neutrophils in patients with coronary atherosclerosis. Modern problems of science and education 2015; 1: URL: www.science-education.ru/121–17420 RussianBlidberg K1, Palmberg L, Dahlén B, et al. Chemokine release by neutrophils in chronic obstructive pulmonary disease. Innate Immun 2012; 18 (3): 503–10. doi: 10.1177/1753425911423270.Blidberg K1, Palmberg L, Dahlén B, et al. Chemokine release by neutrophils in chronic obstructive pulmonary disease. Innate Immun 2012; 18 (3): 503–10. doi: 10.1177/1753425911423270.Rudolf J., Lewandrowski B. Cholesterol, Lipoproteins, High-sensitivity C-reactive Protein, and Other Risk Factors for Atherosclerosis. Clinics in Laboratory Medicine 2014; 34: 113–127. DOI: 10.1016/j.cll.2013.11.003.Rudolf J., Lewandrowski B. Cholesterol, Lipoproteins, High-sensitivity C-reactive Protein, and Other Risk Factors for Atherosclerosis. Clinics in Laboratory Medicine 2014; 34: 113–127. DOI: 10.1016/j.cll.2013.11.003.Nassar H., Lavi E., Akkawi Sa’ed, Bdeir K. et al. α-Defensin: Link between inflammation and atherosclerosis. Atherosclerosis 2007; 194: 452–457. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2006.08.046.Nassar H., Lavi E., Akkawi Sa’ed, Bdeir K. et al. α-Defensin: Link between inflammation and atherosclerosis. Atherosclerosis 2007; 194: 452–457. DOI: 10.1016/j.atherosclerosis.2006.08.046.Schoneveld Michelle A. H., Hoefer. I, Sluijter J. P.G. et al. Atherosclerotic lesion development and Toll like receptor 2 and 4 responsiveness. Atherosclerosis 2008; 197 (1): 95–104.Schoneveld Michelle A. H., Hoefer. I, Sluijter J. P.G. et al. Atherosclerotic lesion development and Toll like receptor 2 and 4 responsiveness. Atherosclerosis 2008; 197 (1): 95–104.Nordestgaard B. J., Chapman M. J., Ray K. Lipoprotein (a) as a cardiovascular risk factor: current status. Eur Heart J.2010; 31: 2844–2853. DOI: 10.1093/eurheartj/ehq386.Nordestgaard B. J., Chapman M. J., Ray K. Lipoprotein (a) as a cardiovascular risk factor: current status. Eur Heart J.2010; 31: 2844–2853. DOI: 10.1093/eurheartj/ehq386.Silveira A., Scanavini D., Boquist S. et al. Relationships of plasma factor VIIa-antithrombin complexes to manifest and future cardiovascular disease. Thrombosis Research 2012; 130: 221–225. DOI: 10.1016/j.thromres.2011.08.02.Silveira A., Scanavini D., Boquist S. et al. Relationships of plasma factor VIIa-antithrombin complexes to manifest and future cardiovascular disease. Thrombosis Research 2012; 130: 221–225. DOI: 10.1016/j.thromres.2011.08.02.Haider DG, Leuchten N., Schaller G. et al. C-reactive protein is expressed and secreted by peripheral blood mononuclear cells. Clin Exp Immunol. 2006; 146 (3): 533–539. DOI: 10.1111/j.1365–2249.2006.03224.Haider DG, Leuchten N., Schaller G. et al. C-reactive protein is expressed and secreted by peripheral blood mononuclear cells. Clin Exp Immunol. 2006; 146 (3): 533–539. DOI: 10.1111/j.1365–2249.2006.03224.Frantz S., Bauersachs J., Kelly R. Innate immunity and the heart, 2005. Current Pharmaceutical Design 2005; 11: 1279–1290. DOI: 10.2174/1381612053507512.Frantz S., Bauersachs J., Kelly R. Innate immunity and the heart, 2005. Current Pharmaceutical Design 2005; 11: 1279–1290. DOI: 10.2174/1381612053507512.Moreno J. A., Ortega-Gomez A., Delbosc S. In vitro and in vivo evidence for the role of elastase shedding of CD 163 in human atherothrombosis. Eur Heart J. 2012; 33: 252–263. DOI: 10.1093/eurheartj/ehr123.Moreno J. A., Ortega-Gomez A., Delbosc S. In vitro and in vivo evidence for the role of elastase shedding of CD 163 in human atherothrombosis. Eur Heart J. 2012; 33: 252–263. DOI: 10.1093/eurheartj/ehr123.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.